Cuando se subclona ADN en la región polylinker del plásmido pUC, la producción de ßgalactosidasa se interrumpe, resultando en que las células son incapaces de hidrolizar X-Gal.
Este experimento suministra un fragmento de ADN junto a un plásmido linear y ligasa T4. Después de la ligación se produce el plásmido recombinante y células competentes de E.coli son transformadas y el número de recombinantes son contadas.
Finalmente la actividad ßgalactosidasa es ensayada a partir de las colonias blancas y azules.
Kit contiene:
Bactobeads E. coli GFP, ADN plasmídico pFluorogreen, tampón, medio, ampicilina, IPTG, CaCl2, Agar listo para usar, placas de Petri, pipetas estériles, asas de siembra y microtubos.
Se necesita:
Micropipetas ( 5-50 microlitros), puntas, 2 baños de incubación (37 y 42ºC), estufa de incubación, termómetro, hielo, microondas y luz ultravioleta
|
